工程化TCR-T细胞免疫疗法在抗癌精准医学中的利弊

本综述提供了对工程化T细胞受体(TCR)免疫疗法的深入了解。已经开发出增强抗癌免疫系统的新方法，包括靶向新抗原、制造新的工程或修饰的TCR，以及为内自杀基因创建安全开关。为了重新激活T细胞对抗肿瘤，免疫动员单克隆抗癌TCR(ImmTAC)已被开发为一类新型的双特异性分子，可识别癌症和T细胞。TCR靶向特殊抗原，如NY-ESO-1、AHNAKS2580F或ERBB2H473Y，以提高抗癌免疫疗法的疗效。转基因T细胞的安全性非常重要。因此，本综述讨论了不同方法的优缺点，例如ImmTAC、单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)和诱导型caspase-9在癌症免疫治疗中的优缺点。与TCR-T细胞疗法和旨在克服免疫抑制的单克隆抗体相关的临床试验，以及最近在理解TCR是如何进行额外检查方面取得的进展。还讨论了可以更好地检测抗原并驱动有效T细胞反应的新方法。

介绍

2018年，GLOBOCAN报告了全球1810万新癌症病例和960万相关死亡。最近的研究检查了新抗原在促进免疫疗法中的作用，指出它们在治疗癌症和提高患者总体存活率方面的潜力。抑制T细胞抑制性受体程序性死亡1(PD-1)并将其配体靶向肿瘤表面PD-L1的抗体，以降低肿瘤微环境(TME)中的T细胞耐受性，最近已被美国食品公司批准和药物管理局(FDA)。抑制PD-1和PD-L1在转移性膀胱癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌和肾细胞癌中取得了可喜的抗肿瘤效果。然而，更有效和更有针对性的方法对于对抗某些对传统疗法有抵抗力的癌症至关重要。

免疫疗法中最强大的治疗策略之一是过继细胞转移(ACT)（图1）。嵌合抗原受体(CAR)和工程化T细胞受体(TCR)是最近用于治疗性T细胞免疫治疗的T细胞受体。TCR工程化T细胞表达具有α和β链的肿瘤抗原特异性受体，这些受体由高质量和高亲和力的抗原特异性T细胞克隆产生。它们被用于开发抗原特异性免疫疗法。最近评估ACT疗法、TCR修饰的T(TCR-T)细胞和免疫检查点抑制剂有效性的临床试验显示出良好的结果。TCR-T细胞的高亲和力和细胞亲和力决定了几种细胞蛋白的特异性结合，这意味着TCR在激活T细胞亲和力方面起着关键作用。与降低基于TCR治疗效率的低亲和力TCR相比，高亲和力TCR（亲和力≥2.5nM）对靶向细胞表面人类白细胞抗原(HLA)具有特异性和敏感性。TCR分子属于免疫球蛋白的一个超家族，由两个共价结合的多态亚基组成，每个亚基都是抗原特异性的，并且与至少四种不同类型的信号转导链相关。

图1 过继性T细胞疗法

在过继细胞治疗法（ACT）中，从癌症组织/T细胞中收集细胞，然后从其他细胞中分离出来，通过工程化的TCR或CAR进行基因操作，共同培养和增殖，并最终送回循环。

为了激活T淋巴细胞，TCR和主要组织相容性复合体(MHC)之间必须存在相互作用（图2）。TCRs和pMHC（肽-MHC）之间相互作用的强度决定了未成熟胸腺细胞的命运，这对幼稚T细胞的存活非常重要。因此，TCR-T免疫治疗技术通过与MHC，尤其是II类分子的有效相互作用来激活宿主的免疫系统；后者被TCR-T细胞和CAR-T细胞特异性识别。TCR-T细胞穿透肿瘤，但CAR-T细胞主要分布在肿瘤外围以接触表面抗原。这使得TCR-T细胞在癌症治疗中更有效。

图2 pMHC和T细胞之间的相互作用

细胞毒性T细胞(CD8+)识别MHC-I、CD3偶联的TCR，这些TCR激活T细胞信号级联，包括钙依赖性和蛋白激酶C信号通路(PKC)。钙是激活活化T细胞(NFAT)的核因子，导致白细胞介素(IL)-2的表达和分泌，以及激活PKC，导致调整和调节ILs的产生和分泌，包括IL-2、T细胞迁移、T细胞增殖、自身免疫和移植排斥。CD4+T细胞能够通过促进调节性T细胞(Treg)来关闭免疫系统。为了激活T细胞增殖，TCR还触发p38MAPK和PI3K/Akt通路。一旦CD4或CD8激活TCR，它就会激活淋巴细胞特异性蛋白-酪氨酸激酶（Lck），从而触发CD3 ζ链的磷酸化。

本综述提供了对TCR-T细胞的见解，特别关注其在临床抗癌免疫治疗中的作用。它还讨论了不同方法的优缺点在抗癌免疫治疗中，包括抗癌免疫动员单克隆T细胞受体(ImmTAC)、诱导型caspase-9和单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)系统。还讨论了TCR-T细胞疗法的临床试验。此外，还研究了以TCR-T细胞治疗为重点的抗癌免疫疗法的各种策略，突出了每种方法在诊断和靶向癌症免疫疗法中的有效性和安全性。

CAR和TCR疗法的比较

在ACT、TCR和CAR疗法中，修饰的T细胞已成功用作治疗实体瘤的范式转换临床免疫疗法（图3）。CAR T细胞被设计成将任意特异性转移到免疫效应细胞上，如T细胞，它专门消除携带抗原的肿瘤细胞。CAR具有源自抗体、CD3z和跨膜域（所谓的第一代CAR）的scFv。通过这种方式，工程化CAR能够识别特定的肿瘤相关抗原。因此，CAR能够结合未加工的肿瘤表面抗原而无需MHC加工，而TCR与嵌入MHC的肿瘤细胞内和表面抗原肽结合（表1）。通常，CAR scFv域用于与细胞表面抗原结合。scFv片段可以以抗原依赖性机制指导T细胞的组成型激活和增殖；然而，一些scFv可能会引导T细胞进入一种不依赖抗原的机制，从而导致治疗失败。

图3 免疫疗法中的TCR与CAR的转基因T细胞

癌症靶向受体TCR和CAR被引入激活的T细胞，使它们能够抵抗特殊类型的癌症。T细胞表面CD3的ζ亚基对于触发T细胞的信号级联至关重要。与需要由内源性CD3激活的TCR不同，CAR是由连接到CD3 ζ子单位的单链可变片段（scFv）制造的混合受体。引入的和内源性TCR都能识别癌细胞上的HLA肽。相反，CAR不直接识别HLA，HLA以独立于TCR的方式触发T细胞信号级联。

表1 比较TCR和CAR的特征。

此外，第一代CARs T细胞显示出有限的扩增和相对较短的持久性，这在临床研究中未能引起强大的抗肿瘤活性。“第二代”CAR的临床活性可由CD3ζ域插入诱导，即共刺激受体CD28(28ζ)、4-1BB/CD137(BBζ)和OX40(OX40ζ) CARs。CD28或CD137/4-1BB被添加到CAR-T细胞的CD3ζ内域，然后促进更强大和持久的T细胞反应。此外，这些靶向CD19抗原（CD19特异性scFv）的第二代CAR对B细胞恶性肿瘤具有高度活性，并具有良好的临床益处。为了克服每个单独的共刺激域的局限性，第三代CARs被提议同时结合两个共刺激信号（CD28和4-1BB），这比第二代具有更好的扩展性和更长的持久性。

    相比之下，TCR是α/β与MHC结合抗原的异二聚体（图3）。如上所述，CARs识别导致T细胞活化，与TCR相比具有不同的功能。当靶向肿瘤特异性抗原时，CAR-T细胞疗法具有某些缺点，例如肿瘤外毒性。与CAR相比，TCR在基于T细胞的治疗中具有几个结构优势，因为它们的受体结构中有更多的亚基（10个亚基对1个亚基）、更大的免疫受体酪氨酸激活基序（ITAM）（10个对3个）、依赖性更小对抗原（1个对100）和更多共刺激受体（CD3、CD4、CD28等）。具有低MHC相互作用亲和力范围(104-106M-1)的TCR已被建议用于有效的T细胞刺激。相反，CAR具有更高的亲和力范围(106-109M-1)和识别细胞表面抗原的解离率。为了保持高抗原敏感性并识别pMHC，已建议使用单体TCR-CD3复合物。相比之下，CAR介导的细胞敏感性取决于更高密度的细胞表面抗原。此外，T细胞/抗原相互作用是在免疫突触(IS)结构中启动的，其中TCR呈现出具有外周LFA-1粘附的环形区域，而CAR显示出没有环形区域的弥漫性LFA-1分布。因此，TCR-IS启动比CAR-IS更慢但持续时间更长的信号。同时，CAR-T细胞表现出更快的杀伤功能并转移到下一个肿瘤靶点（串行杀伤），这与TCR-T细胞的延长信号和更长的杀伤时间形成鲜明对比。

    涉及TCR和CAR疗法的临床试验具有抑制肿瘤进展的潜力。CARs无法有效抑制某些实体瘤的恶性细胞，这是由于存在各种类型的抗原、它们的表达水平、免疫抑制环境以及CARs的构建。然而，TCR-T细胞转移疗法已经有效地治疗了一些实体瘤和血液肿瘤。

重组TCRS

TCR是人体最复杂的受体之一，它包含六个不同的受体亚基，在T细胞中具有非常广泛的信号传导活性。肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)-TCR变化显着影响肿瘤优势T细胞。其中，TCR的变化将有助于T细胞的扩增/增殖。TCR多样性和增加的TIL与抗肿瘤作用相关，选择性TIL中的TCR工程是肿瘤而非外周的最佳治疗方法。TCR由α和β链组成，它们一起结合肽-MHC配体、CD3复合物的信号亚基（ε、γ和δ）以及CD3ζ同源二聚体。除CD3ζ外的所有亚基都具有细胞外免疫球蛋白(Ig)结构域。基于这些结构，设计了免疫动员单克隆修饰的T细胞受体(ImmTAC)，以便能够特异性识别目标HLA-肽。有一些新兴技术利用TCR的信号亚单位并以HLA独立方式提高免疫治疗效率，例如ImmTAC、TRuCs和TAC。

免疫动员单克隆T细胞受体（ImmTAC）

ImmTAC是使用工程化、可溶性和亲和力增强的单克隆TCR(mTCR)设计的。ImmTAC基本上是融合蛋白，它将基于工程化TCR的靶向系统与单链抗体片段(scFv)效应子功能相结合。在ImmTACs的构建中，TCRs被认为是免疫系统内具有抗原识别能力的抗体。然而，虽然抗体仅针对细胞表面或分泌蛋白，但TCR能够识别源自人类白细胞抗原(HLA)呈递的细胞内靶标的肽（图4）。

图4 ImmTAC作用的机制

ImmTAC旨在激活T细胞对抗癌症和病毒感染的细胞。ImmTAC特定于两者位于肿瘤表面的MHC肽(pHLA)和位于T细胞上的CD3。ImmTAC能够直接激活激活的T细胞中的CD3及其相应途径。事实上，CD4和CD8的具体作用是稳定免疫突触，这是由ImmTAC缩短和增强T细胞的重要过程。

ImmTACs具有抑制肿瘤生长的潜力，因为它们通过T细胞重定向发挥其活性。通常，ImmTACs包含肿瘤相关抗原特异性单克隆TCR，可强烈增强对pMHC的亲和力。它们有效地重定向这些细胞以消除癌细胞。ImmTAC通过特异性靶向癌细胞表面的HLA肽复合物与癌细胞结合。TCR对pMHC的皮摩尔亲和力导致ImmTAC覆盖靶细胞，并通过scFv抗体片段和CD3之间的相互作用促进T细胞介导的效应子功能。此外，ImmTAC还以剂量依赖性方式激活CD8+T细胞，EC50值在低pM范围内。已经表明ImmTAC、IMCgp100有效地重定向和激活效应器和记忆CD8+和CD4+细胞。ImmTAC通过分泌多种细胞因子表现出多功能反应，例如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ、IL-6促炎细胞因子、巨噬细胞炎症蛋白-1α-b（MIP1α-b）和IFN-γ诱导蛋白-10。TNF-α和IFN-γ是高效的炎症剂，可促进肿瘤细胞的凋亡并刺激内皮细胞的炎症，以增强TME中免疫细胞的粘附和外渗。参与肿瘤增殖或相关炎症的MIP1α-b蛋白是单核细胞的有效化学引诱物。MIP1α-b蛋白仅由CTL分泌，主要由CD4+T淋巴细胞调节。一项较早的研究表明IMCgp100重定向的T细胞具有多功能表型，即强大的抗癌反应。

此外，选择合适的靶抗原对于制造ImmTAC至关重要。某些失调的非突变蛋白表现为肿瘤相关抗原。二十年前，有必要通过比较肿瘤和正常组织之间的表达水平来区分这些靶标是否对免疫治疗有用。质谱法已被用于识别低丰度肽，因为它具有识别肿瘤抗原翻译后修饰的敏感性和能力。然而，使用质谱法未能检测到pHLA复合物并不意味着它不存在。pHLA靶标具有诱导抗原特异性T细胞反应的能力。MHC多聚体技术可用于分析免疫刺激患者的T细胞反应。它还有助于识别合适的抗原。为了比较ImmTAC靶标，可以在体外和体内研究中进行分析与ImmTAC介导的反应相关的抗原表达。值得注意的是，TCR工程化T细胞的意外脱靶反应性已导致致命的心脏毒性，在两个系列的临床事件中观察到它可以识别心脏组织中MAGE-A3的表位和无关的肌蛋白肌联蛋白。因此，必须首先使用质谱法确认脱靶肽的自然呈递，然后进行ImmTAC识别的体外评估。由于治疗窗口可能受ImmTAC脱靶相互作用的影响，因此应估计它们的亲和力。总的来说，ImmTACs已被证明可以增强TCR-T细胞的抗肿瘤反应，但其安全性需要进一步审查。

T细胞受体融合构建（TRuCs）

最近，开发了具有新靶点特异性和HLA非依赖性细胞潜力的重编程TCR-T细胞。T细胞受体融合构建体(TRuC)，基于抗体的结合域与T细胞受体(TCR)亚基融合，旨在有效识别肿瘤表面抗原。TRuC由融合到五个TCR亚基（TCRα、TCRβ、CD3ε、CD3γ和CD3δ）的细胞外N端的特异性配体抗体组成，为工程化T细胞提供了新的靶标特异性和可被激活的HLA非依赖性靶细胞消除能力通过相应的靶细胞。在慢病毒转导后，TRuC将整合到T细胞表面的天然TCR复合物中。因此，保留了T细胞的激活和效应子功能。与第二代CAR-T细胞相比，这种TCR工程方法显示出更好的抗肿瘤效果。此外，TRuC主导了TCR复合物的完整信号机制，而CAR仅利用分离的CD3ζ细胞质尾的有限信号传导。

T细胞抗原偶联剂(TAC)

T细胞抗原偶联剂(TAC)是另一个平台，它以不依赖MHC的方式结合内源性TCR，以诱导更有效的抗肿瘤反应并降低毒性。TAC嵌合蛋白通过CD3结构域结合与TCR偶联以识别抗原，从而形成TCR/CD3复合物并实现更多T细胞反应。此外，TAC受体的活性主要取决于CD3结合域的选择；因此，合适的scFv可以改善表型和功能特征的结合。例如，源自OKT3的scFv（muromonab-CD3）是最常用的激动性抗CD3抗体之一，与UCHT1相比，其细胞因子产生和细胞毒性较低。因此，与CD3复合物整合的微妙差异可能导致显着不同的功能结果。与第二代CAR相比，TAC工程化T细胞不仅有利于过继注射后实体肿瘤的更大浸润，而且还减少了表达抗原和肿瘤外毒性的健康组织中T细胞的扩增。

其他

最近，已经提出了几种新颖的ACT技术。自然杀伤细胞(NKs)成为基于CAR的疗法(CAR-NKs)的有希望的来源，具有安全性和可用性。NKs以天然细胞毒性启动针对感染和恶性肿瘤的先天免疫反应。CAR修饰的NKs对靶细胞显示出特异性和有效的细胞毒活性，CAR-NKs治疗显着降低了肿瘤的生长。一些临床前数据表明，CAR-NKs在T淋巴细胞恶性肿瘤中可能优于CAR-T细胞，因为可靶向抗原在恶性和正常T淋巴细胞（例如CD5和CD28）上的共同表达。此外，最近的研究表明，干细胞可以分化为功能性免疫细胞和/或与免疫细胞串扰以调节肿瘤免疫环境。与原代免疫细胞相比，分化细胞毒性T细胞和NK的多能干细胞显示出几个优势，例如提高抗肿瘤活性并且产生的数量基本上不受限制。同时，诱导多能干细胞(iPSC)作为一种新型癌症疫苗，对各种类型的癌症取得了有希望的预防和治疗效果。Kooreman等人表明基于自体siPSC的疫苗可以在乳腺癌、间皮瘤和黑色素瘤模型中引发抗肿瘤反应，并减少原发性肿瘤切除后的局部或远处复发。其中，在黑色素瘤中，iPSC疫苗与较少的Th17细胞相关，并促进抗原特异性抗肿瘤T细胞反应。此外，iPSC加CpG疫苗可以通过上调成熟APC、效应T细胞和细胞毒性T细胞来引起强烈的癌症免疫，以及减少调节性T细胞(Treg)的数量。

TCR 副作用

使用基因工程T细胞的ACT已显示出高敏感性，但在一些临床研究中出现了一些严重的不良事件。工程化T细胞中的最佳TCR亲和力至关重要，因此，受体亲和力能够确定T细胞疗法的安全性/有效性。例如，在黑色素瘤和神经母细胞瘤中，一些临床前研究表明T细胞具有先进的强度和持久的抗肿瘤作用。在最近的基于多靶细胞的免疫疗法中，患者接受了针对某些致瘤抗原的CAR-T / TCR治疗，例如对10和4肿瘤特异性CAR-T/TCR联合环磷酰胺或氟达拉滨的介入研究（NCT03638206；NCT03941626）。同时，在最后一次输注后30天内，根据不良事件通用术语标准(CTCAE)v4.03监测与治疗相关的不良事件。毫不奇怪，移植物中TCR表达增加和TCR修饰的T细胞的高频率提高了TCR修饰的T细胞的抗肿瘤效力。此外，将TCR疗法与放射疗法相结合，进一步提高了TCR疗法的效率（表2）。

表2 在工程化TCR-T细胞的临床试验。

由于存在靶向肿瘤外毒性，亲和力成为ACT临床成功的主要障碍。当使用抗原特异性受体时，就功效而言，亲和力应足够高以适当激活T细胞。另一方面，低亲和力TCR相互作用足以激活T细胞，但需要强亲和力才能维持T细胞扩增。在I/II期ACT临床试验中，低亲和力工程化T细胞显示出更安全的特征，但它们的抗肿瘤反应较弱。因此，最佳亲和力是ACT安全性/有效性的关键因素。最近，可逆的Ni2+-次氮基三乙酸组氨酸标签（NTAmers）技术被开发用于有效分离高亲和力细胞毒性T细胞。通过识别T细胞的TCR-pMHC相互作用，可以将工程化的T细胞分为高亲和力和低亲和力亚型。在此，需要先进的亲和力监测技术，以确保安全治疗。

单纯疱疹病毒胸苷激酶

使用T淋巴细胞的免疫疗法是治疗多种恶性肿瘤的有吸引力的策略。然而，由于T细胞免疫疗法的副作用和脱靶，需要找到一种基于工程化T细胞的安全开关机制。许多临床试验试图使用自杀基因来消除潜在的有害细胞。源自单纯疱疹病毒I(HSV-TK)的胸苷激酶基因是最常见的自杀基因之一。因此，HSV-TK和细胞分裂基因(CDK1)之间的转录连接已经基于数学模型进行了设计和量化，以确定该疗法的安全性。自杀系统中的细胞批次和纯合HSV-TK-CDK1可提高安全细胞水平(SCL)，同时确保临床验证的安全范围。

当发生移植物抗宿主病(GvHD)时，可能会发生与造血同种异体移植物相关的严重并发症。由于T细胞移植，这会导致组织和器官损伤。T细胞移植可识别约80%患者的宿主组织相容性。为了预防GvHD，T细胞已使用前药更昔洛韦(GCV)用自杀基因HSV-TK进行基因修饰（图5）。安全开关（自杀基因）在长期依赖细胞的免疫疗法中具有特殊价值。它们还避免了T细胞脱靶相互作用。在这里，自杀基因能够控制治疗过程，并且可以通过早期临床干预启动。例如，在临床试验中，当HSV-TK修饰的T细胞迁移到意外位置时，可以通过正电子发射断层扫描(PET)/CT对其进行监测。

图5 HSV-TK/GCV系统与诱导型caspase-9系统

单纯疱疹病毒-胸苷激酶/更昔洛韦(HSV-TK/GCV)系统消除了致瘤细胞，它对诱导多能干细胞(iPSC)有效且特异，可杀死HSV-TK表达已被沉默的细胞。HSV-TK/GCV系统用作安全开关，它会产生一种有毒化合物来杀死转导的细胞。自杀基因治疗的另一种方法是将诱导型caspase-9(iC9)引入iPSC。iC9二聚化激活iC9，然后触发半胱天冬酶级联反应，从而消除源自iPSC的肿瘤。二聚化(CID)的特定化学诱导剂诱导iC9。

有几个限制。首先，之前的研究观察到少数HSV-TK工程化T细胞患者对GCV失去了敏感性。其次，前药GCV不仅会激活HSV-TK，从而阻止其给药，而且还可以作为抗病毒药物用于其他适应症，如巨细胞病毒(CMV)感染。最后，HSV-TK工程化T细胞具有潜在的免疫原活性。激活自杀基因的自体免疫反应可能会导致转导的T细胞消除，因此会降低它们的治疗效率。新工程转导的T细胞迫切需要具有低毒性、稳定表达和高消除强度的非免疫原性自杀基因。

诱导型Caspase-9

尽管HSV-TK在基于细胞的免疫疗法中显示出安全性，但需要将磷酸化核苷类似物转化为DNA合成才能完全消除肿瘤细胞。具体来说，癌症细胞疗法和再生医学需要快速清除注入的细胞。一个原始的诱导型T细胞安全开关被带到称为caspase-9的供体T细胞（图5）。诱导型caspase-9是一种融合人类诱导的caspase-9(iC9)是一种修饰的人类FK结合蛋白，它可以通过小分子化合物AP1903激活。这个过程依赖于线粒体凋亡途径。在促药物给药后，iC9介导的细胞清除率在半小时内提高到90%。iC9自杀基因的免疫原性较低，会引发针对转基因细胞的免疫反应降低。这是为了维持患者体内稳定的细胞水平。在一项研究中AP1903处理一到两周后，在外周血中检测到多克隆iC9阳性T细胞，具有特异性反应性。因此，iC9细胞自杀系统被证明被激活以保护基于T细胞的免疫疗法并扩大其临床应用。基于iC9的安全开关已被证明比先前存在的自杀基因具有更好的潜力用于细胞治疗。在之前的研究中，已经报道了iC9-T细胞会在体外耗尽其同种异体反应成分。一项新研究表明，一项新的研究表明，iC9同位素的吸收可以在体内完成，并且iC9-T细胞可以在AP1903吸收后的30分钟内消除。

转移的T细胞还可以分泌促炎细胞因子，导致危及生命的GvHD相关细胞因子释放综合征(CRS)。CRS是由包括IL-6和IFN-γ在内的细胞因子水平升高引起的。免疫抑制剂，例如作为抗IL-6受体的托珠单抗，无论是否使用皮质类固醇，都可以逆转这种情况。结果表明iC9激活足以促进异源清除和治疗GvHD，从而快速解决CRS。尽管iC9系统旨在防止T细胞免疫疗法的副作用，任何转基因的整合都具有致突变性和潜在致癌性。因此，评估其潜在风险和收益至关重要。

讨论和总结

酪氨酸激酶属于一类关键的致癌蛋白，包括Her2、EGFR和VEGFR，它们是酪氨酸激酶抑制剂(TKI)靶向的，例如拉帕替尼、吉非替尼和舒尼替尼。然而，使用TKI治疗几周后显示出对化疗的获得性耐药。因此，在抗癌治疗策略中，更低的毒性和更高的功效至关重要。最近，具有最少副作用的基因修饰的T细胞已被证明在治疗实体瘤和液体瘤方面极为有效。激活免疫系统的疗法，例如使用针对免疫检查点PD-1的抗体的疗法，被证明具有巨大的潜力。此外，单克隆抗体的抗原靶向方法、CAR-T细胞疗法和基于TCR的疗法已显示出针对特定肿瘤的不同成功。使用修饰的TCR-T细胞进行临床前和临床研究的疗法具有巨大的潜力。然而，在肺癌中，单独使用ImmTAC疗法已失败。为了恢复ImmTAC效力和肿瘤消退，抗PD-1单克隆抗体显示出有益效果。ImmTAC有效地重定向和激活CD8+和CD4+库中的效应和记忆T细胞。这导致针对黑色素瘤细胞的细胞毒活性。除了直接治疗作用外，ImmTAC还可以重新引导淋巴细胞在T细胞中分泌几种关键细胞因子和趋化因子，例如IFN-γ、ILs（IL-2和IL-6）和TNF-α，从而产生持续的抗肿瘤防御行动。

众所周知，TME可以抑制TIL。工程化TCR能够促进TME中的T细胞运输和激活。最近，E7 TCR基因疗法显示出对HPV癌症的潜在治疗价值。来自TCR工程化人类T细胞的ACT已显示出令人鼓舞的结果。然而，这些方法需要进一步验证。在ACT中，GvHD可能具有不同且不可预测的动力学。还表明TCR/CD3抑制会触发T细胞凋亡。

快速消除注入细胞对于癌症细胞疗法很重要，因为表达具有特定前药的自杀基因的工程化T细胞会通过细胞凋亡迅速消除。Caspase-9是细胞凋亡的关键因素，参与各种化疗刺激。将NK细胞与iC9自杀开关结合可提高抗白血病方法的安全性，从而使其安全临床应用。然而，这种方法也会导致出现不良反应时效应T细胞的快速失活。抗癌和自杀机制可以共存，而不会影响细胞并阻碍杀肿瘤活性。在涉及接受单倍体相同干细胞移植的患者的I期试验中，iC9转导T细胞的安全开关也被证明是可靠的。此外，已观察到HSV-TK是另一种触发头颈癌细胞系凋亡的安全开关。称为TransfeX的新型高效技术将HSV-TK输送到宫颈、口腔和咽部，具有杀瘤作用。因此，用HSV-TK自杀基因改造的TCR-T细胞也可以增强肿瘤治疗。因此很明显，TCR-T细胞免疫疗法除了降低与免疫疗法相关的风险外，还具有根除肿瘤的潜力。

总之，TCR-T ACT具有治疗癌症的良好潜力。TCR调整对于T细胞反应性、免疫反应及其对外来抗原的临床影响至关重要。针对特殊抗原的工程化TCR也提高了免疫治疗的效率。用于ACT的转基因T细胞的安全性也至关重要。本文回顾了TCR T细胞免疫疗法的进展以及可以检测抗原并驱动T细胞反应的最新新技术。然而，在未来的研究中需要解决一些局限性。